Jackson 羊駝家族-納米抗體VHH上市

來源：作者：人氣：-發(fā)表時間：2019-09-24 13:48:00【大中小】

什么是納米抗體？

1993年，比利時科學(xué)家在自然雜志中首次報道羊駝外周血液中存在一種天然缺失輕鏈的抗體，即重鏈抗體（heavy-chain antibody，hcAb）。單域重鏈抗體（single domain antibody，sdAb）是指僅由重鏈抗體可變區(qū)（Variable region）組成的基因工程抗體，又稱為VHH抗體（variable domain of heavy chain of heavy-chain antibody，VHH antibody）或納米抗體（Nanobody，Nb）。

該種抗體只包含一個重鏈可變區(qū)（VHH）和兩個常規(guī)的CH2與CH3區(qū)，卻具有非常好的穩(wěn)定性，不像人工改造的單鏈抗體片段(scFv)那樣容易相互沾粘，甚至聚集成聚體。更重要的是單獨(dú)克隆并表達(dá)出來的VHH結(jié)構(gòu)具有與原重鏈抗體相當(dāng)?shù)慕Y(jié)構(gòu)穩(wěn)定性以及與抗原的結(jié)合活性，是目前已知的可結(jié)合目標(biāo)抗原的較小單位，其分子量只有15KD，也因此被稱作納米抗體。

標(biāo)準(zhǔn)抗體、重鏈抗體和VHH納米抗體

納米抗體的應(yīng)用：

納米抗體的應(yīng)用優(yōu)勢可用于生物醫(yī)藥研發(fā)（基因工程藥物研發(fā)、ADC藥物研發(fā)）；
用于臨床體外診斷（膠體金法、酶聯(lián)免疫吸附法、電化學(xué)發(fā)光法）；
用于腫瘤研究、免疫學(xué)研究等基礎(chǔ)研究；申請具有自主知識產(chǎn)權(quán)的發(fā)明專利及科研獎項(xiàng)；拓展研究思路、發(fā)表國際知名學(xué)術(shù)刊物。
鑒于其獨(dú)特的性質(zhì)，VHH抗體（納米抗體）作為免疫工具越來越受歡迎。Jackson ImmunoResearch開發(fā)了xi相關(guān)試劑，以促進(jìn)在多種平臺上識別VHH抗體，包括WesternBlotting、Elisa、流式細(xì)胞術(shù)和免疫熒光。

美國Jackson ImmunoResearch Inc.是二抗生產(chǎn)商，成立于1982年，專業(yè)致力于親和純化的二抗和純化的免疫球蛋白的生產(chǎn)及偶聯(lián)，30余年的專注，30余年的發(fā)展，Jackson的二抗以種類豐富（物種齊全，標(biāo)記多樣，應(yīng)用廣泛）、性價比高、供貨迅捷而深受國際科研學(xué)者和工業(yè)客戶的青睞。順應(yīng)科技發(fā)展Jackson ImmunoResearch Inc.研究開發(fā)出一系列二抗應(yīng)用于駱駝免疫球蛋白，可用于檢測、分析、加快VHH的發(fā)展研究，并提供羊駝二抗。歡迎來電咨詢：400-021-8158！

進(jìn)口品質(zhì) Jackson二抗之鏈酶親和素、鏈酶親和素標(biāo)記物系列

西寶生物科技（上海）股份有限公司為Jackson ImmunoResearch品牌在華授權(quán)代理商，渠道正規(guī)，并備有大量現(xiàn)貨。若您對Jackson ImmunoResearch產(chǎn)品感興趣，請致電 400-021-8158了解詳情。

納米抗體相對于傳統(tǒng)抗體具有眾多優(yōu)勢：

納米抗體諸多方面均優(yōu)于傳統(tǒng)抗體，基于羊駝重鏈抗體的VHH單域抗體的特殊結(jié)構(gòu)，兼具了傳統(tǒng)抗體與小分子藥物的優(yōu)勢，幾乎完美克服了傳統(tǒng)抗體的開發(fā)周期長，穩(wěn)定性較低，保存條件苛刻等缺陷，逐漸成為新一代治療性生物醫(yī)藥與臨床診斷試劑中的新興力量。相比于常規(guī)抗體，納米抗體的優(yōu)勢有：

分子量小，可穿透血腦屏障；VHH抗體可以穿過血腦屏障，進(jìn)入其他偏遠(yuǎn)的地方，使它們在藥物傳遞中發(fā)揮作用。良好的穩(wěn)定性允許通過多種途徑吸收，包括靜脈和皮下注射、鼻吸入和口服。
原核或真核系統(tǒng)中高表達(dá)；VHH抗體易于克隆和修飾，它們可以在細(xì)菌、酵母和哺乳動物的表達(dá)系統(tǒng)中以高水平重組產(chǎn)生。
特異性強(qiáng)，親和力高；納米抗體較長的CDR3，可形成一穩(wěn)定的暴露的凸環(huán)結(jié)構(gòu)（凸環(huán)中具有穩(wěn)定結(jié)構(gòu)的二硫鍵），能夠深入抗原內(nèi)部以更好的結(jié)合抗原從而提高了其抗原特異性和親和力。納米抗體較長的CDR3，可形成一穩(wěn)定的暴露的凸環(huán)結(jié)構(gòu)（凸環(huán)中具有穩(wěn)定結(jié)構(gòu)的二硫鍵），能夠深入抗原內(nèi)部以更好的結(jié)合抗原從而提高了其抗原特異性和親和力。
對人的免疫原性弱；
耐熱性/穩(wěn)定性好； VHH抗體具有良好的溶解性，對熱、蛋白酶和pH值極端穩(wěn)定

Jackson旗下開發(fā)的VHH結(jié)構(gòu)域抗體是通過從羊駝血清中高度純化的羊駝VHH片段來免疫山羊獲得的。我們已經(jīng)證明這些抗體對羊駝和美洲駝都有很強(qiáng)的識別能力。

實(shí)驗(yàn)案列：

圖1：Ki-67和Tubulin對HEP-2細(xì)胞的雙重標(biāo)記。
HEP-2細(xì)胞采用以下組合染色：
羊駝抗兔ki-67（多克隆）VHH區(qū)域抗體和alexa fluor®488結(jié)合山羊抗羊駝免疫球蛋白G vhh結(jié)構(gòu)域（128-545-230）（綠色）；
小鼠抗Tubulin與RRX結(jié)合。山羊抗鼠免疫球蛋白G（115-295-146）（紅色）。
用DAPI（藍(lán)色）進(jìn)行核染色。

圖2：用ELISA法檢測羊駝或駱駝的VHH抗體。每個rVHH按照10μg/ml涂于elisa板上，用HRP標(biāo)記抗羊駝VHH抗體（128-035-230或128-035-232）和TMB底物檢測。

流式檢測案列：

山羊抗羊駝VHH抗體（例如Alexa Fluor®488共軛128-545-230）可用于檢測患者細(xì)胞上的VHH，而不識別內(nèi)源性免疫球蛋白G或來自小鼠、兔或大鼠的主要抗體。目前的腫瘤學(xué)研究在許多T細(xì)胞定向策略中采用了納米體（VHH）技術(shù)來使用（先天性）免疫防御。這包括產(chǎn)生用于招募和激活細(xì)胞毒性或γδT細(xì)胞的雙特異性格式，納米源嵌合抗原受體（CAR）T細(xì)胞，以及開發(fā)阻斷納米抗體的免疫檢查點(diǎn)（chanier和chames，2019）。修飾性T細(xì)胞的特征通常是通過流式細(xì)胞術(shù)來完成的，這樣就可以對表達(dá)CAR的細(xì)胞進(jìn)行分類和擴(kuò)增。

我們使用多克隆羊駝VHH抗人免疫球蛋白G（而不是CAR）來證明128-545-230在流式細(xì)胞術(shù)中的應(yīng)用。下面的實(shí)驗(yàn)代表淋巴細(xì)胞上的門控樣本。山羊抗羊駝VHH不識別小鼠抗cd19，只有當(dāng)VHH抗人免疫球蛋白G存在時才能檢測到人免疫球蛋白G。


Panel A: 控樣, 不含VHH 抗人免疫球蛋白G 一抗。細(xì)胞僅和小鼠抗-CD19 (APC-H7) 和Alexa Fluor® 488 山羊抗羊駝VHH抗體(128-545-230) 一起培養(yǎng)。 128-545-230 不能區(qū)分人免疫球蛋白G或小鼠一抗。	Panel B: 控樣, 不含小鼠抗-CD19。細(xì)胞僅和VHH 抗人免疫球蛋白G一抗和Alexa Fluor® 488山羊抗羊駝VHH抗體一起培養(yǎng)。檢出淋巴細(xì)胞表觀免疫球蛋白G	Panel C: 雙標(biāo)細(xì)胞。細(xì)胞和小鼠抗-CD19 (APC-H7), VHH 抗人免疫球蛋白G一抗, 和Alexa Fluor® 488 山羊抗羊駝VHH抗體(128-545-230) 一起培養(yǎng)。在右上方顯示存在淋巴細(xì)胞，對人免疫球蛋白G和CD19皆顯陽性。

常用的羊駝和VHH二抗產(chǎn)品列表

標(biāo)記物	☆山羊抗羊駝免疫球蛋白G (H+L)	☆山羊抗羊駝免疫球蛋白G (H+L)(min X 牛, 人, 小鼠, 兔, 大鼠血清蛋白)	☆山羊抗羊駝免疫球蛋白G, 子類 2+3 特異性(min X 牛, 人, 小鼠, 兔, 大鼠血清蛋白)	山羊抗羊駝免疫球蛋白G, VHH(min X 牛血清蛋白)	山羊抗羊駝免疫球蛋白G, VHH抗體(min X 牛, 人, 小鼠, 兔, 大鼠血清蛋白)
未標(biāo)記	1.0 mg 128-005-003	1.0 mg 128-005-160	0.5 mg 128-005-229	0.25 mg 128-005-232	0.25 mg 128-005-230
辣根過氧化物酶	1.0 ml 128-035-003	0.5 ml 128-035-160	0.25 ml 128-035-229	0.25 ml 128-035-232	0.25 ml 128-035-230
堿性磷酸酶	1.0 ml 128-055-003	0.5 ml 128-055-160	0.25 ml 128-055-229	0.25 ml 128-055-232	0.25 ml 128-055-230
生物素	1.0 ml 128-065-003	0.5 ml 128-065-160	0.25 ml 128-065-229	0.25 ml 128-065-232	0.25 ml 128-065-230
DyLight™ 405	1.0 mg 128-476-003	0.5 mg 128-475-160	0.25 mg 128-475-229	0.25 mg 128-475-232	0.25 mg 128-475-230
Alexa Fluor® 488	1.0 mg 128-545-003	0.5 mg 128-545-160	0.25 mg 128-545-229	0.25 mg 128-545-232	0.25 mg 128-545-230
Fluorescein (FITC)	1.0 mg 128-095-003	0.5 mg 128-095-160	0.25 mg 128-095-229	0.25 mg 128-095-232	0.25 mg 128-095-230
Cy™ 3	1.0 mg 128-165-003	0.5 mg 128-165-160	0.25 mg 128-165-229	0.25 mg 128-165-232	0.25 mg 128-165-230
Rhodamine (TRITC)		0.5 ml 128-115-160	0.25 ml 128-115-229	0.25 ml 128-115-232	0.25 ml 128-115-230
Rhodamine Red-X™	1.0 mg 128-295-003	0.5 mg 128-295-160	0.25 mg 128-295-229	0.25 mg 128-295-232	0.25 mg 128-295-230
Alexa Fluor® 594	1.0 mg 128-585-003	0.5 mg 128-585-160	0.25 mg 128-585-229	0.25 mg 128-585-232	0.25 mg 128-585-230
Alexa Fluor® 647	1.0 mg 128-605-003	0.5 mg 128-605-160	0.25 mg 128-605-229	0.25 mg 128-605-232	0.25 mg 128-605-230
Cy™ 5		0.5 mg 128-175-160	0.25 mg 128-175-229	0.25 mg 128-175-232	0.25 mg 128-175-230

備注：☆這些抗體主要與Fc區(qū)反應(yīng)，不建議用于檢測VHH抗體（納米抗體）

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