質譜級賴氨酰肽鏈內切酶 Lysyl Endopeptidase(R)

來源：作者：人氣：-發表時間：2025-07-01 09:53:00【大中小】

質譜級賴氨酰肽鏈內切酶

Lysyl Endopeptidase®

本產品是質譜分析前處理時常用的蛋白分解酶即賴氨酰肽鏈內切酶，該酶可以特異性切除賴氨酸基團C末端的多肽，可用于蛋白測序分析和 Lys-X 化合物的酶合成。若同時使用賴氨酰肽鏈內切酶和胰酶，可更好地切斷賴氨酸基團的多肽，增加多肽的數量。產品已按照使用習慣做成小包裝，是方便使用的冷凍干燥品。20 μg/支可用于100-200個樣品的凝膠內消化。

來源：細菌

外觀：凍干粉（包含２ mmol/L Tris-HCl 緩沖液，pH８）

活性：0.03～0.07 AU/vial

分子量：27,000（瓊脂糖過濾），30,000（SDS-PAGE）

溶解性：溶于水或緩沖液

穩定性：溶解于 pH 值 5.0-12.0 的 Tris 緩沖液中，可在４℃穩定保存２年；在 pH 值 6.0-11.0、30℃時能穩定保存，但溫度超過50℃時不穩定。

最適pH值：9.0~9.5

等電點：6.9~7.0

底物特異性：

可水解底物——Tos-Lys-OMe、Bz-Lys-NH₂、Bz-Lys-pNA、Lys-pNA

不可水解底物——Bz-Arg-NH₂、Bz-Arg-pNA、Arg-pNA

抑制劑：DFP、PMSF、TLCK

◆特點

● 高特異性、高蛋白質消化率、適用于蛋白質譜分析

● 提高裂解效率、增加肽段數量

● 根據使用量特意制備小包裝，方便使用

◆應用

分別采用胰蛋白酶（Tp）、賴氨酰肽鏈內切酶（Lys-C）和 Tp與Lys-C 聯用進行膠內酶切的效果比較。

牛血清蛋白 BSA 的條帶（100 ng）通過 SDS-PAGE 獲得，然后分別用 Tp、Lys-C 和 Lys-C+Tp 進行酶切，再用 MALDI-TOFMS 法進行分析。

這些蛋白酶的實驗效果見下表。

表 1：Tp、Lys-C 和 Lys-C+Tp 的結果對照

這些結果表明 Lys-C 酶解的漏切位點數（Missed Cleavage）最少。Tp 酶解時加入 Lys-C 后，漏切位點數有所降低，同時，可以鑒定出更多的多肽。

	Tp	Lys-C	Lys-C+Tp
裂解位點	精氨酸和賴氨酸的Ｃ端	賴氨酸的Ｃ端	精氨酸和賴氨酸的Ｃ端
漏切位點數（漏切位點所占比例）	多（８%）	很少（０%）	少（３%）
鑒定出的多肽數量	１７	１９	２２

胰蛋白酶（Tp）（圖ａ）和賴氨酰肽鏈內切酶（Lys-C）+Tp（圖ｂ）酶切后的質譜結果對照圖。

Lys-C+Tp 酶切后，可以在 m/z=2000 時得到吸收峰，而單獨的 Tp 酶切在 m/z=2000 時沒有吸收峰。該結果表明 Lys-C 可以提高測序覆蓋度。

( 數據由大阪醫療中心和婦嬰健康研究所Ｙ. Wada 博士提供 )

賴氨酰肽鏈內切酶

賴氨酰肽鏈內切酶，最初由 Masaki 等人從土壤細菌中分離得到。該酶可以特異性剪切賴氨酸殘基Ｃ末端和Ｓ-氨乙基半胱氨酸殘基的肽鍵，用于蛋白測序和 Lys-X 化合物的酶催化合成。該酶穩定性高，在４Ｍ尿素或 0.1% SDS 溶液中 30℃ 孵育６小時之后，仍然擁有完整的生物活性。

外觀	凍干粉（包含ca. 10% Tris-HCl buffer，pH 8）	活性	見包裝
分子量	27,000（凝膠過濾）；30,000 (SDS-PAGE)	溶解性	易溶于水或緩沖液
最佳pH	9.0-9.5（酰胺酶的最佳活性 pH）	等電點	6.9-7.0
抑制劑	DFP、PMSF、TLCK	來源	細菌
穩定性	溶于pH 值 5.0-12.0 的緩沖液中，可于４℃穩定保存。溶于pH 值 6.0-11.0 的緩沖液中，可于30℃穩　定保存，但是50℃及以上不穩定。
單位定義	一單位酰胺酶（AU）指在30℃ pH 9.5 時每分鐘產生１ μmol 對硝基苯胺所需的酶量。
底物特異性	水解底物：Tos-Lys-Ome、Bz-Lys-NH₂、Bz-Lys-pNA、Lys-pNA
底物特異性	非水解底物：Bz-Arg-NH₂、Bz-Arg-pNa、Arg-pNA

※ 本頁面產品僅供研究用，研究以外不可使用。

產品列表

產品編號	產品名稱	產品規格	產品等級
125-05061	Lysyl Endopeptidase^®, MS Grade 賴氨酰肽鏈內切酶，MS級	20 μg×5	質譜級
121-05063	Lysyl Endopeptidase^®, MS Grade 賴氨酰肽鏈內切酶，MS級	20 μg	質譜級
050-05941	Endoproteinaseglu C, Sequencinggrade 測序級谷氨酰蛋白內切酶Glu-C	50 μg	生物化學分析級
202-15951	Trypsin, from Porcine Pancreas, Mass Spectrometrygrade 豬胰腺胰蛋白酶質譜級別	20 μg×5	質譜級