測(cè)序級(jí)重組賴氨酰內(nèi)肽酶/胰蛋白酶預(yù)混裝

來(lái)源：作者：人氣：-發(fā)表時(shí)間：2025-06-16 10:02:00【大中小】

測(cè)序級(jí)重組賴氨酰內(nèi)肽酶/胰蛋白酶預(yù)混裝

◆概述

本品選用A. Lyticus 來(lái)源氨基酸序列，利用獨(dú)特大腸桿菌重組表達(dá)技術(shù)制備的Lys-C，能夠特異性識(shí)別并酶切肽鏈中Lys羧基端肽鍵；其與重組表達(dá)并經(jīng)甲基化修飾的測(cè)序級(jí)胰蛋白酶，經(jīng)研究和方法驗(yàn)證，按照特定比例混合后，能夠在一次酶切或分步酶切中，保證特異性的前提下，酶切效率更高，便于進(jìn)行序列分析。

◆優(yōu)勢(shì)

1）采用甲基化修飾重組表達(dá)胰蛋白酶，其賴氨酸殘基經(jīng)甲基化修飾有效防止酶切緩沖中胰酶自切或被Lys-C降解造成胰酶活性的降低。

2）獨(dú)有的Lys-C重組表達(dá)制備技術(shù)，保證高純度與高酶活性的同時(shí)，無(wú)任何雜酶活性，確保酶切反應(yīng)的特異性。

◆純度·來(lái)源

選用A. Lyticus 來(lái)源氨基酸序列，利用獨(dú)特大腸桿菌重組表達(dá)技術(shù)制備的Lys-C

選用豬的胰腺來(lái)源陽(yáng)離子型胰蛋白酶基因，利用畢赤酵母菌株重組表達(dá)技術(shù)制備的胰蛋白酶

◆使用方法

溶解緩沖：用無(wú)菌水或者50 mmol/L Tris-HCl，pH 8.0~8.5；溶解后分裝，-15℃以下保存。

酶切緩沖：50 mmol/L Tris-HCl，pH 8.0~8.5

推薦條件：蛋白酶:融合蛋白質(zhì)量比1:25~1:100（蛋白組學(xué)或肽圖）37℃反應(yīng)。

針對(duì)疏水性強(qiáng)、溶解性較差的蛋白，可添加變性劑或者封閉二硫鍵（烷基化）使其空間結(jié)構(gòu)被打開(kāi)，從而提高酶切效率或者提高肽圖覆蓋率。

可以參考以下方法：

兩步溶出法消化：可以添加終濃度為5 mmol/L的DTT 在室溫反應(yīng)30 min ；再加入終濃度為10 mmol/L 的碘乙酰胺，在室溫避光反應(yīng)30 min。蛋白溶液中補(bǔ)入終濃度6~8 mol/L 尿素，胰蛋白酶/Lys-C 與蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)混合物以1：25 的蛋白質(zhì)∶蛋白酶比(w/w)混合并在37℃下孵育3~4 h，用酶切緩沖稀釋尿酸降至1 mol/L 以下，在37℃反應(yīng)過(guò)夜。

終止反應(yīng)：加入終濃度0.5-1%三氟乙酸，14000-16000×g，離心10 min 去除沉淀顆粒。

◆保存條件

儲(chǔ)存穩(wěn)定性：凍干粉存于-15℃以下，24 個(gè)月穩(wěn)定；50 mmol/L Tris-HCl pH 8.0~8.5 溶解后儲(chǔ)存于-15℃以下，反復(fù)凍融5次，無(wú)活性損失。

運(yùn)輸穩(wěn)定性：冰袋保溫運(yùn)輸，活性穩(wěn)定。

◆應(yīng)用實(shí)例

Lys-C/Trypsin Mix 與Trypsin 特異性酶切抗體對(duì)比圖

蛋白酶：?jiǎn)慰官|(zhì)量比1:25，37℃酶切反應(yīng)過(guò)夜。

(更多范疇?wèi)?yīng)用實(shí)例，請(qǐng)與我們聯(lián)系)

◆產(chǎn)品列表

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格
RME0101	RLys-C/MTP Mix 重組賴氨酰肽鏈內(nèi)肽酶/重組胰蛋白酶混合裝	20 μg/支
RME0102	RLys-C/MTP Mix 重組賴氨酰肽鏈內(nèi)肽酶/重組胰蛋白酶混合裝	20 μg/支，5 支

◆相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格
RLYS-C0401	RLys-C 重組賴氨酰內(nèi)肽酶	20 μg
RLYS-C0403	RLys-C 重組賴氨酰內(nèi)肽酶	1 mg