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測序級重組胰蛋白酶MTrypsin

來源:作者:人氣:-發表時間:2025-06-12 09:46:00【
測序級重組胰蛋白酶MTrypsin
 
◆概述
胰蛋白酶(Trypsin; EC 3.4.21.4)是一種絲氨酸蛋白酶,酶解賴氨酸及精氨酸C末端形成的肽鍵。重組豬胰蛋白酶是由重組畢赤酵母表達并采用層析色譜法純化獲得,氨基酸序列與豬胰腺來源的陽離子型胰蛋白酶完全一致。未經修飾的胰蛋白酶自切降解肽段,可能對蛋白質測序及液質聯用質量肽圖檢測造成干擾,自切降解會造成消化樣品過程中酶活性降低,且被證明可能產生胰糜蛋白酶活性。本品為重組表達胰蛋白酶,多步純化無雜酶活性;經還原甲基化修飾,在蛋白組學及質量肽圖研究中,對單獨酶切或與Lys-C分步/混合酶切時,對蛋白酶水解具有抵抗力,從而保證其活性高穩定性好。活性受絲氨酸蛋白酶抑制劑如TLCK、PMSF等的抑制,金屬離子螯合劑如EDTA等抑制酶活。
◆特點
● 優良的穩定性:0.1 mg/mL測序級胰蛋白酶MTP,于50 mmol NH4HCO3酶切緩沖中37℃水浴反應過夜(15 h),酶活保留超過90%。
● 良好的特異性:利用測序級胰蛋白酶MTP,1:50(w/w)酶切人胰島素B鏈,RP-HPLC于214 nm波長檢測酶切產物,酶切16 h產物與2 h產物相比,產物肽峰比例增加而個數為2個且不隨時間延長增加。
◆特性
性狀 白色或類白色凍干粉
純度 ≥95%
相對分子量 23 kDa±2.3 kDa
酶比活性 ≥3800 USP/mg 
◆來源
由重組畢赤酵母表達并采用層析色譜法純化獲得,氨基酸序列與豬胰腺來源的陽離子型胰蛋白酶完全一致。 
◆穩定性
酶穩定性對比研究
考察樣品均為RTP凍干粉或MTP凍干粉用10 mmol/L HCl或50 mmol/L NH4HCO3溶解的酶溶液(含量為0.1 mg/mL)。
image.png
◆使用方法
溶解緩沖:10 mmol/L HCl或CH3COOH,20 mmol/L CaCl2;溶解后分裝-15℃以下保存。
酶切緩沖:50 mmol/L Tris-HCl或50 mmol/ NH4HCO3,1 mmol/L CaCl2,pH 7.6~8.0;
推薦條件:50 mmol/L Tris-HCl或50 mmol/ NH4HCO3,1 mmol/L CaCl2酶切緩沖中,1:20~1:100比例與待消化蛋白(含量0.5~1.0 mg/mL)混合,30~37℃進行酶切反應;經變性處理的蛋白,尿素或鹽酸胍建議稀釋至1 mol/L以下。
◆應用實例
MTP與RTP用于酶切質量肽圖對比
image.png
 
獲取質譜分子量肽峰個數
備注
MTP(黑色)
13
1:50酶切15 h
RTP(藍色)
9
◆保存條件
儲存穩定性:凍干粉存于-15℃以下,24個月穩定;HCl或CH3COOH溶解后,分裝凍存于-15℃以下。
運輸穩定性:冰袋保溫運輸,活性穩定。
※ 本頁面產品僅供研究用,研究以外不可使用。
產品列表
產品編號 產品名稱 產品規格
MTP1504 測序級重組胰蛋白酶MTrypsin 20 μg
MTP1505 測序級重組胰蛋白酶MTrypsin 20 μg×5

 

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此文關鍵字:重組胰蛋白酶 MTrypsin