抗體親和層析-高純度重組蛋白A（Seebio(R) rProtein A）

來源：作者：人氣：-發表時間：2023-09-28 09:17:00【大中小】

單克隆抗體在目前仍是廣泛使用的生物藥物。Protein A 填料具有高親和性、可操作性、可放大性以及法規記錄，因此幾乎所有商業批準的 mAb 制造工藝均使用 Protein A 填料捕獲作為下游純化的初始步驟。Seebio為更好地適應客戶的需求，對蛋白 A 填料產品不斷升級改造，推陳出新。

蛋白A（Protein A）

蛋白A (Staphylococcus Protein A，簡稱SPA)是金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的一種膜蛋白，具有與抗體特異性結合的能力，蛋白A親和層析柱已成為應用廣泛的純化抗體的親和柱，可從腹水、血清和細胞培養上清或細胞抽提物中分離和純化多種哺乳動物不同亞型的抗體或包含抗體Fc片段的基因工程重組蛋白。

天然蛋白A結構穩定，不耐酸堿，分子內部不存在二硫鍵，擁有5個高度同源的區域，與IgG有結合作用。蛋白A與多種來源的IgG都有很強的親和力，結合位點位于IgG的Fc段，不影響IgG結合抗原的活性。目前，以蛋白A為親和配基的親和層析介質已廣泛應用于單克隆抗體和Fc重組融合蛋白的純化。

圖1：金黃色葡萄球菌 Protein A

Protein A 填料作為抗體純化的核心步驟，在純化過程中需要進行在位清洗 (clean-in-place, CIP)以達到重復利用的目的，節省高昂的層析介質成本。氫氧化鈉 (0.1-0.5 M)溶液是有效的清潔劑，但天然 Protein A 受其序列限制不能耐受高濃度的堿液清洗。往往導致蛋白A的變性和脫落。

西寶生物成通過基因重組改造，去除了天然ProteinA中的IgG非結合區，僅由Fc結合區組成，同時經突變改造，并引入了抗蛋白酶的鏈接子降低空間位阻，使rProteinA有了更高的動態結合容量，顯著提高了耐酸堿處理能力。經層析純化獲得。純化過程不使用抗體柱親和層析，避免產品中摻入無關IgG。

Seebio® 重組蛋白A（rProtein A）簡介

產品名稱	Seebio® 重組蛋白A（rProtein A）
英文名稱	Recombinant Protein A
貨號	ECL0019H
Purity（SDS-PAGE）	≥95%
來源	E.coli
分子量	28.2kDa
外觀	凍干粉末
標簽	His標簽

Seebio®重組蛋白A特性與用途

Seebio重組蛋白A的C末端含有半胱氨酸，可定向偶聯到固體分離介質上，用于單克隆抗體或多克隆抗體的純化。可結合大多數人或小鼠免疫球蛋白子類(如人IgG1、IgG2、IgG4；小鼠IgG2、IgG2a、IgG2b、IgG3)，還可結合牛、倉鼠、兔的總免疫球蛋白。

Seebio重組蛋白A可與多種報告分子(熒光染料、酶標記、生物素、膠體金、放射性標記等)偶聯而不影響其與抗體結合的活性。這些偶聯后的蛋白A衍生物可用于Western blot、ELISA、免疫組化等的抗體檢測。

Seebio®重組蛋白A優勢

非抗體柱純化，產品中無其它抗體如IgG等的污染。
可耐受0.5 M NaOH和0.5M HCl 處理，不降解，抗體結合能力不變
高PH洗脫，降低IgG聚集。
產品有特為抗體純化柱設計的連接基團，可直接用于蛋白A柱的制備。
質量穩定：批量生產，可保證穩定連續的批次生產；產品批次間無差異，質量穩定。
純度高：宿主蛋白殘留小。
凍干粉：易于儲存和運輸；
符合法規要求：生產設備和生產環境符合相關法規要求，生產過程遵循 ISO 9001質量體系。

Seebio®重組蛋白A產品說明

穩定性：重組蛋白A凍干粉存儲于2-8℃，24個月穩定；偶聯時用PBS (pH7.4)溶解，現配現用；用水溶解后，-20℃以下保存。

儲存：2-8℃ 儲存，不可凍存。

產品列表

貨號	中文名稱	包裝規格
ECL0019H	Seebio® 重組蛋白A（rProtein A）-層析填料專用	10mg
		100mg
		1g
		1kg

附表：Protein A、Protein G、Protein L結合抗體能力比較

物種	亞類	Protein A	Protein G	ProteinL
人	IgG	+++	+++	+++
	IgG1	++++	++++	++++
	IgG2	++++	++++	++++
	IgG3	-	+++	+++
	IgG4	++++	++++	++++
	IgM	+	-	+++
小鼠	IgG	++	++	+++
	IgGl	+	++++	+++
	IgG2a	++++	++++	+++
	IgG2b	+++	+++	+++
	IgG3	++	+++	+++
	IgM	-	-	+++
兔	IgG	+++	+++	+
山羊	IgG	+	++	-
	IgG1	+	+++	-
	IgG2	+++	+++	-
綿羊	IgG	+	++	-
	IgGl	+	++	-
	IgG2	+++	+++	-
大鼠	IgG	+	++	+++
	IgGl	-	+	+++
	IgG2a	-	++++	+++
	IgG2b	-	++	+++
	IgG2c	++	++	+++
	IgG3	+	++	N/A
狗		++	+	N/A
豬		+++	++	+++
Kappa鏈抗體		-	-	+++