支原體清除試劑：解決細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染問題的利器

來源：作者：人氣：-發(fā)表時(shí)間：2024-11-25 14:54:00【大中小】

支原體（Mycoplasma）是已知最小的原核細(xì)胞型微生物，因其無細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)、形態(tài)多變和體型微小，其大小介于0.1至0.3微米之間，能夠輕松通過濾菌設(shè)備。支原體可穿透孔徑為0.22微米的除菌濾膜，這一特性使其成為細(xì)胞培養(yǎng)中難以徹底解決的污染源。截至目前，科學(xué)界已記錄了超過100種支原體種類。

支原體清除是細(xì)胞培養(yǎng)中一個(gè)重要的步驟，因?yàn)橹гw污染會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的可靠性和結(jié)果。首先，支原體能夠干擾細(xì)胞的正常生理功能，影響細(xì)胞的生長、分裂和代謝過程，從而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不準(zhǔn)確。其次，支原體污染還可能引發(fā)細(xì)胞凋亡或壞死，進(jìn)一步影響實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性。此外，支原體還可能攜帶并傳播其他病原體，增加實(shí)驗(yàn)過程中的風(fēng)險(xiǎn)。

針對(duì)支原體污染，支原體清除試劑提供了一種高效解決方案。該試劑包含兩類主要藥物：一種可抑制支原體蛋白質(zhì)合成，另一種可阻斷支原體DNA合成。通過連續(xù)7至14天的處理，該試劑能夠徹底殺滅并清除支原體，其效果持久可靠。

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	濃度
支原體清除試劑I	100mL	100×
支原體清除試劑II	100mL	100×

經(jīng)測(cè)試，該清除試劑對(duì)包括293T、HeLa、CHO-K1、LX2、SP2/0、ST、Vero、HA-VSMC、Jurkat及Min-6等在內(nèi)的超過20種細(xì)胞系均表現(xiàn)出顯著的支原體清除效果。同時(shí)，試劑對(duì)細(xì)胞的正常生理功能未產(chǎn)生明顯負(fù)面影響，未觀察到顯著毒副作用，確保細(xì)胞培養(yǎng)的安全性與穩(wěn)定性。

1、試劑保存與稀釋

將支原體清除試劑I和II分裝成小規(guī)格，置于4℃冰箱保存。如短期內(nèi)未使用，剩余試劑需存放于-20℃冷凍以保持藥物效力。使用時(shí)，按照1:100的體積比例，將試劑加入到全培養(yǎng)基中。

2、細(xì)胞培養(yǎng)準(zhǔn)備

以T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶為例，接種50-100萬個(gè)細(xì)胞，加入4-6 mL含支原體清除試劑新的全培養(yǎng)基。

3、培養(yǎng)基更換與細(xì)胞傳代

每2-3天更換一次含支原體清除試劑新的全培養(yǎng)基。進(jìn)行細(xì)胞傳代時(shí)，需先離心，取適量細(xì)胞轉(zhuǎn)移到新的T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，并添加含支原體清除試劑的新鮮全培養(yǎng)基。

4、支原體檢測(cè)與處理周期

經(jīng)過7-10天處理后，使用支原體檢測(cè)試劑盒檢測(cè)支原體清除情況。如仍有殘留，可繼續(xù)處理1-2個(gè)周期后再檢測(cè)。為確保徹底清除支原體，建議在1個(gè)月后進(jìn)行復(fù)檢，以排除潛在的污染風(fēng)險(xiǎn)。

支原體污染對(duì)生物工程 3D 腎囊腫形成能力的影響

保存方法

-20 ℃保存，有效期3年。

注意事項(xiàng)

不建議將高濃度的試劑I和II混合后保存，以免影響藥物效力的穩(wěn)定性。

參考文獻(xiàn)：

1、 Teresa M DesRochers，et al. The effects of mycoplasma contamination upon the ability to form bioengineered 3D kidney cysts. PLoS One. 2015 Mar 20;10(3):e0120097.