細(xì)胞葡萄糖攝取檢測(cè)試劑盒 Glucose Cellular Uptake Measurement Kit

來源：作者：人氣：-發(fā)表時(shí)間：2024-09-05 10:44:00【大中小】

細(xì)胞內(nèi)葡萄糖吸收檢測(cè)試劑盒

Glucose Cellular Uptake Measurement Kit

◆原理

胰島素是降血糖的激素，它能夠以脂肪細(xì)胞或者骨骼肌等為中心促進(jìn)糖輸送活性，將糖從細(xì)胞外吸收到細(xì)胞內(nèi)。

測(cè)定糖的吸收量一般是使用3H標(biāo)記的3-O-甲基-D-葡萄糖和2-脫氧葡萄糖（2DG）的方法。這種方法需要用同位素，所以只能在RI管理區(qū)域內(nèi)使用，在一般的實(shí)驗(yàn)室也無法使用。

本試劑盒使用安全，操作簡單，用non-RI法能夠簡便地測(cè)定細(xì)胞內(nèi)糖吸收量。

試劑盒測(cè)定

細(xì)胞吸收的2DG會(huì)在己糖激酶的催化下會(huì)被2-脫氧葡萄糖-6磷酸（DG6P）氧化，不繼續(xù)進(jìn)行酶反應(yīng)而是留在細(xì)胞內(nèi)。

本試劑盒是在葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PDH）的酶反應(yīng)下，生成2DG6P成比例地生成NADPH，然后NADPH發(fā)生氧化生成熒光基質(zhì)后就可以測(cè)定熒光物質(zhì)的熒光強(qiáng)度。

◆優(yōu)點(diǎn)•特色

●　檢測(cè)2-deoxyglucose (2DG) (葡萄糖類似物) 攝入的總量

●　葡萄糖，2DG被細(xì)胞攝取后，在己糖激酶作用下，迅速磷酸化為2-脫氧葡萄糖-6-磷酸（2DG6P）。

●　而2DG6P在細(xì)胞內(nèi)聚集，不會(huì)發(fā)生進(jìn)行代謝。

●　細(xì)胞裂解物中的2DG6P在耦合酶作用下，產(chǎn)生熒光信號(hào)，其強(qiáng)度與2DG6P的量正相關(guān)。

●　利用已知2DG6P的標(biāo)準(zhǔn)曲線，對(duì)照檢測(cè)的熒光強(qiáng)度計(jì)算樣品2DG水平

相關(guān)產(chǎn)品比較

	【本試劑盒】 Measurement Kit, Broad Range, Fluorometric Cat. No. MBR-PMG-K01E	【相關(guān)產(chǎn)品】 2-Deoxyglucose (2DG) Uptake Measurement Kit Cat. No. CSR-OKP-PMG-K01E
測(cè)定方法	Non-RI法	Non-RI法
操作時(shí)間	3小時(shí)	5~7小時(shí)（2天）
檢測(cè)方法	熒光（Ex 540 nm/Em 590 nm）	發(fā)光（420 nm）
特征	測(cè)定范圍廣（0~50 μm）能夠迅速進(jìn)行測(cè)定可以使用高通量法一步測(cè)定	高靈敏度（0~5 μm）定量檢測(cè)試劑盒

◆案例•應(yīng)用

試劑盒組成

試劑	規(guī)格	數(shù)量	儲(chǔ)存（開封后）
2DG6P Solution (1 mM)	500 μL	3×3 mL	-20°C (避光)
Sample Diluent Buffer Concentrate (100x)	5 mL	1 vial
Substrate Buffer	9 mL	1 vial
Fluorescent Substrate	120 μL	1 vial
Enzyme Solution	270 μL	1 vial

該試劑盒可進(jìn)行100次反應(yīng)

需要準(zhǔn)備：

●　超純水（蒸餾水）

●　2-deoxyglucose 建議產(chǎn)品

●　牛血清白蛋白建議產(chǎn)品

●　96-well黑色多孔板

●　96-well熒光酶標(biāo)儀（激發(fā)波長540 nm/熒光波長590 nm）

●　超聲波細(xì)胞裂解裝置

胰島素刺激3T3-L1細(xì)胞分化后2DG的攝取情況

※具體操作見“相關(guān)資料”

◆產(chǎn)品列表

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格
CSR-MBR-PMG-K01E	Glucose Cellular Uptake Measurement Kit (Broad Range, Fluorometric) 細(xì)胞葡萄糖攝取檢測(cè)試劑盒	100 tests