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測序級(jí)谷氨酰蛋白內(nèi)切酶 Endoproteinase Glu-C

貨號(hào)：050-05941
包裝：50ug

英文名：Endoproteinase Glu-C， Sequencing Grade
別名：胞內(nèi)蛋白酶 Glu-C
級(jí)別：用于生物化學(xué)
品牌：Wako
CAS：66676-43-5

【050-05941】測序級(jí) 谷氨酰蛋白內(nèi)切酶，Endoproteinase Glu C, Sequencing grade，CAS: 66676-43-5，是一種絲氨酸蛋白酶。其特異性取決于緩沖液和pH以及可能的切割位點(diǎn)周圍的結(jié)構(gòu)。

*西寶提示：我司所銷售的化學(xué)試劑、原料等所有產(chǎn)品（包括但不限于抗生素類、蛋白質(zhì)類、試劑盒類產(chǎn)品等）僅限用于科學(xué)研究用途，不得作用于人體。

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貨號(hào)：050-05941

測序級(jí) 谷氨酰蛋白內(nèi)切酶

Endoproteinase Glu C, Sequencing grade

用于生物化學(xué)

CAS ：66676-43-5
EC編碼：3.4.21.19
EINECS編號(hào)：200-350-6
MDL編號(hào)：MFCD01324998
GHS ：警告

谷氨酰蛋白內(nèi)切酶簡介

使用蛋白酶裂解多肽鏈的條件較溫和，因此氨基酸殘基側(cè)鏈的修飾（氧化，鹵代，脫酰胺等）并不會(huì)發(fā)生，含有這些基團(tuán)修飾（結(jié)合位點(diǎn)在碳水化合物鏈，脂類、磷酸酯，硫酸等）的多肽通常會(huì)以完整形式良好收率回收。在相同消解條件下，得到片段的重現(xiàn)性很好。蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)分析使用高底物特異性的酶，因?yàn)閺陌被峤M成可以大致預(yù)測片段數(shù)量及其平均大小。更重要的是，可以避免由于部分（非特異性）裂解導(dǎo)致分離復(fù)雜。

源自金黃色葡萄球菌V8的谷氨酰蛋白內(nèi)切酶，是一種絲氨酸蛋白酶。其特異性取決于緩沖液和pH以及可能的切割位點(diǎn)周圍的結(jié)構(gòu)。在乙酸銨（pH4.0）或碳酸氫銨（pH7.8），Glu-C切割谷氨酸的羧基端肽鏈。在磷酸緩沖液（pH7.8）中，Glu-C會(huì)切割谷氨酸和天冬氨酸的羧基端肽鏈。據(jù)報(bào)道Glu-C在0.2% SDS（十二烷基硫酸納）和4.0M尿素中有活性。

降解特異性：使用B鏈胰島素(insulin Box)作為底物反應(yīng)1小時(shí)后的速率：≥85 %

谷氨酰蛋白內(nèi)切酶性質(zhì)

外觀：凍干粉末，不含鹽
來源：金黃色葡萄球菌 V8
生物活性：≥ 15u/mg 蛋白質(zhì)

谷氨酰蛋白內(nèi)切酶應(yīng)用

獲取表層蛋白（S-layer proteins, 來自嗜熱脂肪芽孢桿菌ATCC 12980）的蛋白水解片段，以進(jìn)行親和研究。
酶切天然VSTx-3肽（voltage sensor toxin 3）以測定序列。
重組純化PimA（磷脂酰肌醇甘露糖轉(zhuǎn)移酶）的部分蛋白水解。
糖化血紅蛋白消解，用于液相-同位素稀釋質(zhì)譜聯(lián)用分析。

谷氨酰蛋白內(nèi)切酶產(chǎn)品列

貨號(hào)	產(chǎn)品	包裝	級(jí)別
050-05941	Endoproteinase Glu C, Sequencing grade 測序級(jí) 谷氨酰蛋白內(nèi)切酶 Glu-C	50ug	生化試劑

谷氨酰蛋白內(nèi)切酶重組和蛋白酶活性：

碳酸氫銨緩沖液(pH 7.8) 或乙酸銨緩沖液 (pH 4.0): 該酶切割谷氨酸的羧基端肽鏈。
磷酸緩沖液 (pH 7.8): 該酶特異性切割谷氨酸和天冬氨酸的羧基端肽鏈。

特異活性：如標(biāo)簽所示。

25℃下使用 Z-Phe-Leu-Glu-4-nitroanilide作為底物。
純度：單峰 (RP-HPLC)

樣品： 20 μg谷氨酰蛋白內(nèi)切酶
分離柱：Aquapore RP 300, 7 Fm 4.6H×100 mm.
溶劑A：水 (含0.1% 三氟乙酸)
溶劑B：乙腈：水＝70:30 (含0.1% 三氟乙酸)
梯度：30 分鐘線性梯度 0-100％ B.
流速：0.5 ml/min.
檢測波長：215 nm

消解特異性：使用B鏈胰島素作為底物，消解反應(yīng)開始1小時(shí)后反應(yīng)速率大于等于85 %

①Pre (1)-Glu (13), ②Ala (14)-Glu (21), ③Arg (22)-Ala (30)

消解液：100μg B鏈胰島素＋10μg 谷氨酰蛋白內(nèi)切酶溶于100μl碳酸銨緩沖液 (25 mmol/l, pH 7.8), 1 小時(shí); 25℃
樣品：10 μl 消解液＋90 μl碳酸銨緩沖液
柱子：Aquapore RP 300, 7 μm 4.6φ×100 mm

分離條件:
溶劑：乙腈：水＝70:30 (含0.1% 三氟乙酸)
流速：0.5 ml/min
檢測波長：215 nm

貯存條件：在2-10℃下保存。等份溶液保存在-20℃下。
包裝：50μg

谷氨酰蛋白內(nèi)切酶參考資料

(1) Houmard, J. and Drapeau, G. R. ：Proc. Natl. Acad. Sci.USA., 69, 3506 (1972)
(2) Drapeau, G. R. ：Can. J. Biochem ., 56, 534 (1978)
(3) Seetharama, R. and Seetharama, A., J. Cell. Biochem.,30, 87 (1986)


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050-05941 谷氨酰蛋白內(nèi)切酶 Endoproteinase.Glu-C 66676-43-5

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