蛋白酶K是一種絲氨酸蛋白酶,因此可以用苯甲基磺酰氟抑制其作用,苯甲基磺酰氟是一種絲氨酸蛋白酶的抑制劑。在純化蛋白質(zhì)時(shí)用于防止蛋白質(zhì)的降解。
英文名:Proteinase K
CAS號(hào):39450-01-6
包裝規(guī)格
100mg,500mg,1g, 更大包裝請?jiān)儍r(jià):400-021-8158
產(chǎn)品優(yōu)勢
不含DNase,不含RNase,進(jìn)口分裝,可直接使用。
應(yīng)用舉例
蛋白酶K在尿素和SDS中穩(wěn)定,還具有降解天然蛋白質(zhì)的能力,因而它應(yīng)用很廣泛,主要用在基因診斷試劑盒、基因組DNA提取試劑盒、RNA提取試劑盒中去除DNA和RNA制備中的核酸酶,也可以用于提取組織中非蛋白成份降解含有蛋白質(zhì)的雜質(zhì)。譬如DNA疫苗和肝素的制備等。
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蛋白酶K,是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。此酶經(jīng)純化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中穩(wěn)定,還具有降解天然蛋白質(zhì)的能力,因而它應(yīng)用很廣泛,包括制備脈沖電泳的染色體DNA,蛋白質(zhì)印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作濃度是50—100μg/ml。在較廣的pH范圍內(nèi)(pH 4-12.5)均有活性。
推薦反應(yīng)緩沖液:50mMTris-HCl(pH7.5),10mM CaCl2。
蛋白酶K在原位雜交技術(shù)中通常用于雜交前的處理,它具有消化包圍靶DNA蛋白質(zhì)的作用,以增加探針與靶核酸結(jié)合的機(jī)會(huì),提高雜交信號(hào)。但蛋白酶K的濃度過高、消化時(shí)間過長或孵育溫度過高時(shí),都會(huì)對細(xì)胞的結(jié)構(gòu)有一定的破壞,導(dǎo)致組織切片的脫落,細(xì)胞核的消失,從而影響雜交結(jié)果。EDTA緩沖液可以替代蛋白酶K的作用,解決上述出現(xiàn)的問題,并能達(dá)到理想的染色效果。
Activity(37 ℃)
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≥34.0U/mg
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Purity
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99.5%
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DNase
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none
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RNase
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none
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Appearance
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White lyophilized powder
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