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抗體稀釋緩沖液選擇及應(yīng)用

來源:作者:人氣:-發(fā)表時(shí)間:2024-11-21 14:20:00【
抗體稀釋緩沖液是一種用于稀釋抗體的溶液,通常在免疫實(shí)驗(yàn)中使用,如Western Blot、免疫熒光(IF)、免疫組化(IHC)等。抗體稀釋緩沖液的主要作用是防止抗體效價(jià)下降,減少非特異性吸附,并提高實(shí)驗(yàn)的特異性和靈敏度。
抗體稀釋緩沖液的配方和成分根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)需求有所不同。一些緩沖液中會(huì)添加牛血清白蛋白(BSA)作為穩(wěn)定劑,以防止抗體在稀釋過程中失活。此外,某些緩沖液還可能包含防腐劑如疊氮鈉,以延長稀釋液的保存時(shí)間。
主要作用
維持抗體穩(wěn)定性:提供一個(gè)適宜的pH值和離子強(qiáng)度環(huán)境,防止抗體變性或失活。
降低非特異性結(jié)合:減少抗體與非目標(biāo)蛋白或基質(zhì)的結(jié)合,提高實(shí)驗(yàn)的特異性。
優(yōu)化抗體與抗原的結(jié)合:通過調(diào)節(jié)緩沖液的成分,可以影響抗原-抗體反應(yīng)的效率。
抗體稀釋液產(chǎn)品
說明
應(yīng)用
抗體稀釋液(普通型)
抗體稀釋液(普通型)(Antibody Dilution Buffer)用于普通抗體的稀釋,可防止抗體效價(jià)下降,減少抗體非特異性吸附。稀釋后的抗體在4℃可以短期保存,抗體的效價(jià)會(huì)隨時(shí)間而下降。
按照適當(dāng)比例稀釋抗體,例如 1:1000,即將1μl抗體加入到1ml稀釋液中。抗體稀釋后可直接用于實(shí)驗(yàn),在一次孵育結(jié)束后,可以回收稀釋的抗體,4℃短期保存,以用于下次的實(shí)驗(yàn),但抗體的效價(jià)會(huì)隨時(shí)間而降低。
封閉用抗體稀釋液
抗體稀釋液中添加了抗體保護(hù)劑,可以保持抗體的活性和穩(wěn)定性,減少特異性結(jié)合,降低非特異性的背景著色,提高實(shí)驗(yàn)的特異性和靈敏度。主要成分由Tris-HCl緩沖液、牛血清白蛋白、疊氮鈉組成。
封閉
通用型免疫測定抗體稀釋液
抗體稀釋液用在所有免疫測定中稀釋抗體。不含免疫球蛋白BSA,不含磷酸鹽、疊氮化鈉或汞防腐劑。可用于稀釋所有抗體,包括過氧化物酶偶聯(lián)物和針對磷蛋白的抗體。不適合稀釋針對S100蛋白的抗體。
用于稀釋一抗或二抗。稀釋后的抗體可在2-8℃下保存數(shù)周。該通用抗體稀釋緩沖液已被用于血液學(xué)及組織學(xué)研究的免疫印跡。
免疫組化用抗體稀釋緩沖液
對組織或3D細(xì)胞培養(yǎng)物執(zhí)行免疫組化(IHC)研究。該緩沖液由含0.2%吐溫20、肝素、3%驢血清和5%DMSO的PBS組成。有助于抗體穿透至組織并封閉非特異性信號,有助于在任何組織或3D細(xì)胞培養(yǎng)物深度下實(shí)現(xiàn)清晰、明亮成像。可快速透明化用于3D成像的熒光標(biāo)記組織,最大限度地減少組織皺縮、膨脹或其他形態(tài)學(xué)變化,與大多數(shù)熒光基團(tuán)(包括染料和熒光蛋白)兼容。
抗體稀釋緩沖液用于稀釋一抗或二抗。
抗體稀釋緩沖液的pH值通常為7.0至7.4,這是因?yàn)檫@個(gè)范圍內(nèi)的緩沖液能夠更好地保持抗體的活性和結(jié)合特性。此外,緩沖液中的離子強(qiáng)度也會(huì)影響抗體的結(jié)合效果,因此在選擇稀釋緩沖液時(shí)需要考慮這些因素。
在使用抗體稀釋緩沖液時(shí),通常需要根據(jù)抗體的效價(jià)和實(shí)驗(yàn)的具體要求進(jìn)行稀釋。一抗的稀釋比例可能從1:100到1:1000不等,稀釋后的抗體可以短期保存在4℃下,但效價(jià)會(huì)隨時(shí)間逐漸降低。
實(shí)驗(yàn)一、
 
胞外囊泡鑒定外周炎癥期間血腦通訊的新機(jī)制
試驗(yàn)二、
 
參與變形鏈球菌表面蛋白翻譯后修飾的 pgf 操縱子的表征
抗體稀釋緩沖液中pH值和離子強(qiáng)度影響
pH值的影響
pH值對抗體的穩(wěn)定性有顯著影響。研究表明,當(dāng)pH值大于6.5或小于8.5時(shí),抗原抗體結(jié)合效率會(huì)受到嚴(yán)重影響。極端的pH值會(huì)導(dǎo)致抗體分子變性,破壞抗原識(shí)別表位,從而降低抗原抗體的結(jié)合效率。
抗體的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)在pH 7.4-7.6時(shí)形成強(qiáng)結(jié)合,但在pH 7時(shí)僅形成弱結(jié)合。這表明pH值在特定范圍內(nèi)對抗體的結(jié)合能力有顯著影響。天冬氨酸組成的CDR對pH變化敏感,隨著pH值的升高,免疫球蛋白之間的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用增強(qiáng)。
離子強(qiáng)度的影響
離子強(qiáng)度通過靜電相互作用影響抗體與分析物的結(jié)合。當(dāng)離子強(qiáng)度低于0.005 M PBS時(shí),IC50顯著增加;而當(dāng)離子強(qiáng)度高于0.01 M PBS時(shí),IC50大幅降低。這表明鹽類會(huì)與抗體競爭,通過靜電相互作用與分析物競爭,從而降低分析的可檢測性。
大多數(shù)稀釋液含有毫摩爾量的氯化鈉或其他鹽,以減少帶電分子之間的非特異性相互作用。然而,過強(qiáng)的離子強(qiáng)度應(yīng)避免,因?yàn)樗赡軙?huì)克服高親和力抗體-表位結(jié)合所需的特定電荷相互作用。
注意事項(xiàng)
抗體稀釋緩沖液通常可在4℃下保存數(shù)月,使用前建議過濾以去除顆粒物,同時(shí),針對特定實(shí)驗(yàn)需求,可能需要對緩沖液的配方進(jìn)行優(yōu)化以獲得最佳效果。
* 部分內(nèi)容來自網(wǎng)絡(luò)及論文
參考文獻(xiàn)
1. Zh. Tian, et alDevelopment and optimization of an indirect enzyme-linked immunosorbent assay for 19-nortestostero.Journal of Animal and Feed Sciences, 17, 200
2. Nina Hahn, et al. Protecting RNA quality for spatial transcriptomics while improving immunofluorescent staining quality. Front Neurosci. 2023 May 18:17:1198154
3. Balusu S, et al. Identification of a novel mechanism of blood-brain communication during peripheral inflammation via choroid plexus-derived extracellular vesicles. EMBO Mol Med. 2016 Oct 4;8(10):1162-1183.
4. Alejandro Avilés-Reyes, et al. Characterization of the pgf operon involved in the posttranslational modification of Streptococcus mutans surface proteins. Sci Rep. 2018 Mar 16;8(1):4705.
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