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KANEKA KanCapA(TM) 抗體純化樹脂

來源：作者：人氣：-發(fā)表時(shí)間：2024-02-19 09:35:00【大中小】

新標(biāo)準(zhǔn)　抗體純化樹脂

KANEKA KanCapA™

本產(chǎn)品為 Protein A 親和層析樹脂。用于從活體樣本及細(xì)胞培養(yǎng)上清純化免疫球蛋白及包含 Fc 段的重組抗體。

本產(chǎn)品由高交聯(lián)纖維素微珠及新研發(fā)的耐堿 Protein A 配體構(gòu)成，可用于 IgG 的親和純化。

◆特點(diǎn)

•　耐堿

•　良好洗脫條件

•　高抗體結(jié)合能力

•　可循環(huán)使用

•　便于擴(kuò)增

◆關(guān)于改良 Protein A

KanCapA™ 采用的不是天然 Protein A，而是使用變異型Ｃ域５聚物的新型 Protein A。

天然 Protein A的Ｃ域結(jié)合于 Fc 段，也結(jié)合于 Fab 段，其中與VH3亞家族抗體的反應(yīng)性較高。該類型的解離需要弱酸條件下洗脫。

為改善該問題，使用分子設(shè)計(jì)系統(tǒng)重新設(shè)計(jì)分子，研發(fā)了保持耐堿性、改善 Fab 段的非特異性結(jié)合及洗脫曲線的 Protein A。

本產(chǎn)品采用的 Protein A

1. C5 聚體蛋白質(zhì)		良好pH條件下清晰地洗脫抗體
2. 較高的耐堿性
3. 減少 Fab 段的非特異性結(jié)合

◆產(chǎn)品特性

KANEKA KanCapA™　產(chǎn)品特性

矩陣	高交聯(lián)纖維	※ 　　1)　平均粒度為累積體積分布的中間粒度　　2)　５%動(dòng)態(tài)結(jié)合容量為前端分析測(cè)定（停留時(shí)間３分鐘）　　3)　可在強(qiáng)堿條件下清洗，但請(qǐng)避免長(zhǎng)時(shí)間的清洗　　4)　請(qǐng)勿冷凍
平均粒度¹⁾	65-85 μm
配體	Protein A，重組(抗強(qiáng)堿)
結(jié)合	化學(xué)結(jié)合（還原胺化）
動(dòng)態(tài)結(jié)合容量²⁾	≧35 mg 人多克隆 IgG／mL載體
化學(xué)穩(wěn)定性³⁾	使用親和層析通用可溶性溶媒時(shí)較穩(wěn)定
pH 范圍³⁾	pH 2-13
靜止清洗條件³⁾	0.1-0.5 mol/L氫氧化鈉 6-8 mol/L尿素、6 mol/L鹽酸胍
流量	最大 500cm/h（層高：20-25 cm）
停留時(shí)間	≧３分鐘（建議：４-６分鐘）
保存條件⁴⁾	20%乙醇渾濁液，１～10℃

◆應(yīng)用

1、Fab段　純化應(yīng)用

•　利用 KANEKA KanCapA™ 的特點(diǎn)，可從經(jīng)木瓜蛋白酶處理后的 IgG 溶液分餾 Fc 段及 Fab 段。

2、IgG 洗脫曲線（pH3.5 & pH3.0）

•　洗脫范圍已優(yōu)化，可清晰地分餾提純。

3、通過強(qiáng)堿清洗進(jìn)行樹脂循環(huán)

•　進(jìn)行 300 次循環(huán)處理后（0.1M 氫氧化鈉溶液 15 分鐘），IgG 的結(jié)合容量的減少率仍低于20%，表明其循環(huán)性能較高。

使用 0.1 M 氫氧化鈉溶液進(jìn)行循環(huán)處理后的 IgG 結(jié)合活性曲線數(shù)據(jù)

循環(huán)處理后（0.1 M 氫氧化鈉溶液 15 分鐘）的IgG回收率及 Protein A 配體的滲濾量的曲線數(shù)據(jù)

4、動(dòng)態(tài)結(jié)合容量　曲線數(shù)據(jù)

•　在4-6分鐘停留時(shí)間過程中，DBC 較高。

※　動(dòng)態(tài)結(jié)合容量表示純化樣本在流動(dòng)的狀態(tài)下，回收程度的數(shù)值。動(dòng)態(tài)結(jié)合容量較高的載體的流速較快，可回收大量目標(biāo)分子，因此可以認(rèn)為在短時(shí)間內(nèi)有效純化目標(biāo)分子的優(yōu)質(zhì)載體。

KANEKA KanCapA™的Dynamic Binding Capacity (DBC; 動(dòng)態(tài)結(jié)合容量)　曲線數(shù)據(jù)

5、不同大小的樹脂填充裝柱的壓力/流速繪圖數(shù)據(jù)

填充依賴壓力的計(jì)算方法是從整體壓力減去系統(tǒng)壓力。

6、KANEKA KanCapA™　于各種大小的柱的填充效果

•　KANEKA KanCapA™ 適用于各種大小的柱。

充填方法	L. D.(cm)	高度(mm)	培養(yǎng)皿/m	非對(duì)稱性
流動(dòng)填充	4.4	200	5710	1.14
軸向力填充	7	199	6063	1.06
流動(dòng)填充	10	201	5276	1.18
流動(dòng)填充	30	200	5208	1.17
軸向力填充	45	233	4712	1.09

以下是脈沖注入數(shù)據(jù)：

可溶性溶媒：1(v/v)% 丙酮

注入量：1% 柱容量

流速：60 cm/h

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品等級(jí)
114-01071	KANEKA KanCapA™	2mL (net 1mL)	for Genetic Research
110-01073	KANEKA KanCapA™	10mL (net 5mL)	for Genetic Research
118-01074	KANEKA KanCapA™	50mL (net 25mL)	for Genetic Research