符合GMP生產標準的全能核酸酶，高效、可重復性去除DNA

來源：作者：人氣：-發表時間：2020-09-14 17:01:00【大中小】

在生物制品的制備/生產過程中，去除DNA殘留是極為重要的。常用的去除DNA的方法如沉淀法在DNA殘留要求較高的時候難以達到，因為會發生聚集和包裹現象，影響去除效率。而酶解法在使用時需摸索較佳條件，操作繁瑣，重復性差。直至全能核酸酶的出現，才能可重復性地去除DNA，保證了生物制品的高品質和高產量。西寶生物隆重推出DENARASE®全能核酸酶，采用非動物性原料，不添加抗生素，符合GMP生產標準，滿足法規要求，在病毒載體疫苗等領域應用廣泛。訂購熱線 400-021-8158。

產品描述

DENARASE®全能核酸酶是一款來自粘質沙雷菌的基因工程內切酶，是生物制品生產工藝中常用全能核酸酶的典型代表。DENARASE®全能核酸酶能夠降解所有形式的DNA和RNA(包括單鏈、雙鏈、線性、超螺旋和環狀DNA、RNA及基因組DNA)，形成較小的寡核苷酸（主要由2-5個堿基對組成）對核酸序列沒有特異性，且沒有蛋白酶活性。

分子量：27 kDa (具有兩個相同亞基的單體)
適合pH：pH 8.0~9.0
適合溫度：37℃
等電點：pH 6.2
輔因子：Mg²⁺

產品以液體形式提供，制劑組成：20mM Tris鹽酸鹽緩沖液pH8.2，20mM氯化鈉，2mM氯化鎂，50%甘油(v/v)。

產品優勢

采用革蘭氏陽性的芽孢桿菌生產，降低了內毒素污染風險；
采用非動物性原料，不添加抗生素，符合GMP生產標準；
降解所有形式的DNA和RNA；
無蛋白酶、內毒素污染；
廣泛的試劑兼容性；
超高的核酸消化活力；
每批次產品嚴格質保與功能驗證。

質量指標

項目	標準值
外觀	無色透明溶液
活性*	≥250u/ul
純度	≥99%
比活	＞6*10^5 U/mg
蛋白酶活性	未檢出
內毒素水平	＜0.25EU/Ku
菌落總數	致病菌<5cfu/200ul; 霉菌&酵母<5cfu/200ul

*活性單位定義：在37℃，pH 8.0反應條件下，在30 min內使△A260吸收值變化1.0（相當于消化37μg鮭魚精DNA成為寡核苷酸）所用的酶量定義為一個活性單位（U）。

合規性/證書

制造過程符合歐盟cGMP要求。

本產品的進一步生產不使用抗生素或使用來自動物的原材料（無動物產品和BSE/TSE證書）。

儲存條件

在-20°C的儲存溫度下，從出廠之日起24個月內穩定。注意：不建議將產品儲存在-70°C或以下，因為冷凍產品會導致活性損失。

產品應用

用于疫苗的病毒或病毒樣顆粒純化：核酸酶通過去除病毒類產品外源性核酸，降低核酸殘留毒性風險，提高產品安全性；
改善重組蛋白工藝：進行重組蛋白純化或者自然蛋白提取研究中，第一步就需要用裂解液對其進行裂解釋放蛋白，此時往往伴隨著大量的基因組DNA被釋放出來，很多并不是獨立存在的，往往與核蛋白以復合物的形式存在，導致提取物很粘稠，呈鼻涕狀。蛋白提取過程中若不能很好處理這些粘稠基因組，會造成蛋白提取效率的降低和丟失。
若在加裂解液的同時加入一定量的DENARASE®全能核酸酶，可以很好的清除粗提物中的核酸，降低粘度，提高后續操作的效率。工程細胞裂解后加入核酸酶可降低料液的黏度，縮短處理時間，提高蛋白產量；
顆粒(病毒、包涵體等)預處理：核酸很容易粘附在病毒樣顆粒（VLP）、病毒粒子、包涵體等細胞生成顆粒的表面，使顆粒大小或電荷發生改變，造成這些顆粒的聚集。全能核酸酶可降解核酸，避免核酸對細胞產物的影響，利于提高細胞產物純化效率；
電泳和色譜樣品的制備：用于ELISA、柱層析、二維電泳和印跡分析的樣品制備，經核酸酶處理后可提高分辨率和回收率。

作用條件

條件參數	適合條件	可作用條件
Mg²⁺	1-2 mM	1-10 mM
pH	8.0-9.2	6.0-10.0
Temp	37℃	0-42℃
DTT	0-100 mM	>100 mM
β-Mercaptoethanol	0-100 mM	>100 mM
Monovalent cation（Na⁺，K⁺）	0-20 mM	0-150 mM
PO₄^3-	0-10 mM	0-100 mM

訂貨信息

名稱	貨號	規格	描述
DENARASE 全能核酸酶	TCE0358A-100K	100KU	>250 U/ul，制造和罐裝均符合cGMP
	TCE0358A-500K	500KU
	TCE0358A-1000K	1000KU
	TCE0358A-5000K	5000KU
	TCE0358A-1M	1MU	>250 U/ul，制造符合cGMP，罐裝符合ISO9001
	TCE0359A-5M	5MU	>250 U/ul，制造符合cGMP，罐裝符合ISO9001

DENARASE全能核酸酶與EonucleaseGTP ELISA核酸內切酶殘留檢測試劑盒（Cygnus，貨號F960）搭配使用，更佳。

核酸酶殘留檢測試劑盒

這款核酸酶檢測試劑盒具有極高的靈敏度和特異性，主要用于定量檢測重組病毒載體和疫苗制備過程中可能存在的內切酶雜質。哺乳動物細胞培養用于表達重組病毒載體和疫苗，這種方法成本效益高，適用于大規模生產基因治療和疫苗生物制品。在這些產品的生產和純化過程中，內切酶污染是一個需要重視的問題，因為內切酶常被用來清除宿主細胞的內源性DNA和RNA，以及未整合的病毒載體質粒DNA。因此，將內切酶污染降到最低至關重要。

該試劑盒利用Serratia marcescens基因工程內切酶產生的抗體和親和純化技術。其檢測限大約為60pg/ml，提供了一種高靈敏度和特異性的檢測方法，有助于純化過程的開發、過程控制、常規質量控制以及產品放行測試。試劑盒采用簡便的同步操作協議，樣品中的內切酶與HRP標記的抗內切酶檢測抗體在微孔板條上同時反應，而微孔板條上涂有經過親和純化的捕獲抗內切酶抗體。

內切核酸酶試劑盒包含所有必需成分，用于檢測96個樣本中的內切核酸酶雜質，包括一套校準的內切核酸酶標準品。它適用于檢測基因工程內切核酸酶，例如Benzonase核酸酶和DENARASE。

產品信息

檢測方法	ELISA
檢測工具	96孔板
檢測時間	約1h50min
檢測限	0.06ng/ml
定量限	0.31ng/ml

訂購信息

產品貨號	產品名稱	產品規格	產品用途
F960	EndonucleaseGTP® ELISA Kit	1 kit	核酸酶殘留檢測試劑盒
I600	Recommended Diluent	25ml/100ml	稀釋試劑