Wako LabAssay(TM)系列定量檢測試劑盒 - 細(xì)胞生物學(xué)用

來源：Seebio.cn作者：西寶生物人氣：-發(fā)表時(shí)間：2012-02-09 13:39:00【大中小】

LabAssay(TM)系列定量檢測試劑盒 - 細(xì)胞生物學(xué)用

編號	名稱	容量
292-63901	LabAssay (TM) A/G 白蛋白與球蛋白比值檢測試劑盒	1000 Test
290-65901	LabAssay (TM) Creatinine 肌氨酸酐定量檢測試劑盒	500 Test
298-65701	LabAssay (TM) Glucose 葡萄糖定量檢測試劑盒	1000 Test
294-63601	LabAssay (TM) NEFA 游離脂肪酸定量檢測試劑盒	750 Test
296-63801	LabAssay (TM) Phospholipid 磷脂定量檢測試劑盒	1300 Test
290-63701	LabAssay (TM) Triglyceride 甘油三酯定量檢測試劑盒	1000 Test
291-58601	LabAssay (TM) ALP 堿性磷酸酶定量檢測試劑盒	900 Test
294-65801	LabAssay (TM) Cholestero 膽固醇定量檢測試劑盒	1000 Test
292-64001	LabAssay (TM) Uric Acid 尿酸定量檢測試劑盒	1300 Test

LabAssay (TM) ALP堿性磷酸酶定量檢測試劑盒 Alkaline Phosphatase Assay Kit

產(chǎn)品摘要

堿性磷酸酶的活性檢測試劑盒。常用于檢測培養(yǎng)的成骨細(xì)胞、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血清和骨組織中的堿性磷酸酶活性。

堿性磷酸酶(ALP)廣泛分布于肝臟、骨、小腸之中。特別在骨代謝研究領(lǐng)域方面被用作為骨形成指標(biāo)之一。本品是用p–硝基苯磷酸作為底物的堿性磷酸酶檢測試劑盒，利用微孔板，可進(jìn)行多種樣品的檢測。

檢測原理

樣品在含有p-硝基苯磷酸的碳酸鹽緩沖液(pH9.8)中反應(yīng)，在樣品中的堿性磷酸酶作用下，p-硝基苯磷酸分解為p-硝基酚和磷酸。生成的p-硝基酚為堿性，呈黃色。根據(jù)測量其405nm的吸光值，計(jì)算出樣品中堿性磷酸酶的活性。

LabAssay(TM)ALP [p-硝基苯磷酸基質(zhì)法]

性能

■檢測范圍：>0.06 mmol/L
■標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍：0～0.5 mmol/L
■再現(xiàn)性：C.V.<10%

試劑盒組成

■底物---------------------20片（溶解時(shí)：p-硝基苯磷酸二鈉 6.7mmol/L)
■底物溶解液-------100ml×1瓶（2.0mmol/L氯化鎂含有0.1mol/L碳酸鹽緩沖液pH9.8)
■反應(yīng)終止液-------100ml×1瓶（0.2mol/L氫氧化鈉溶液）
■標(biāo)準(zhǔn)液---------------10ml×1瓶（0.5mmol/L p-硝基酚溶液）

試劑的配制

1）底物緩沖液：1片底物溶解于5mL底物溶解液中。
2）反應(yīng)終止液：直接使用。
3）系列稀釋標(biāo)準(zhǔn)液：將標(biāo)準(zhǔn)液用蒸餾水依次稀釋為0.5、0.25、0.125、0.0625 mmol/L等2倍率稀釋液系列。

標(biāo)準(zhǔn)操作法

向96孔微孔板內(nèi)添加100μl底物緩沖液和20μl樣品，在微孔板震蕩器上充分振蕩1分鐘后，37℃孵育15分鐘。添加80μl反應(yīng)終止液，在微孔板震蕩器上充分振蕩1分鐘后，用酶標(biāo)儀測量405nm處的吸光值。同樣方法進(jìn)行空白(蒸餾水)對照和標(biāo)準(zhǔn)品的檢測。

活性單位的定義

在pH9.8，37℃情況下，1分鐘內(nèi)生成1nmol p-硝基酚所需的酶的活性為1個(gè)活力單位（U）。

活性（U/μl）= C/15 ×a　
C：由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的OD值(A實(shí)驗(yàn)值減去A空白值)，計(jì)算p-硝基酚濃度(mmol/L=nmol/μl) 15：反應(yīng)時(shí)間(min.)
a：樣品的稀釋倍數(shù)

當(dāng)樣品為成骨細(xì)胞時(shí)，本試劑盒使用前需要預(yù)處理

■在48孔板上進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)后，除去培養(yǎng)基，用PBS沖洗感光板，各孔添加150μl 0.05%的曲拉通X，進(jìn)行凍結(jié)→融化→凍結(jié)→融化操作。4℃，15,000rpm離心15分鐘處理，將上清液移到新的輔助管，以此作為樣品。

(注1）48孔板：培養(yǎng)時(shí)，一般不采用96孔板，多使用48孔板。
(注2) 曲拉通X的作用：溶解細(xì)胞膜，回收蛋白(細(xì)胞內(nèi)含有ALP蛋白)的試劑。
(注3) 反復(fù)的凍結(jié)融化：原理不明，但這樣做似乎可以提高ALP活性。
(注4) 也有不使用曲拉通X，用超聲波降解法(超聲波處理)對細(xì)胞造成物理性休克得到溶解產(chǎn)物的方法。
(注5) 曲拉通X的添加量：以150μL為例，孔中細(xì)胞約為20,000cell。

產(chǎn)品編號	品名	規(guī)格	容量
291-58601	LabAssay (TM) ALP	細(xì)胞生物學(xué)	900次

LabAssay(TM)A/G[BCG法、雙縮脲法]

本品是包含總蛋白顯色劑（基于雙縮脲法）、白蛋白顯色劑（基于BCG法）、標(biāo)準(zhǔn)血清的檢測試劑盒。可同時(shí)檢測總蛋白及白蛋白濃度，計(jì)算出白蛋白/球蛋白比。

特點(diǎn)

〈白蛋白〉
■蒸餾水作為樣品時(shí)，吸光值為0.120～0.220。
■測量已知濃度的血清時(shí)，結(jié)果在已知濃度的±12％以內(nèi)。

〈總蛋白〉
■蒸餾水作為樣品時(shí)，吸光值為0.050～0.100。
■測量已知濃度的血清時(shí)，結(jié)果在已知濃度的±10%以內(nèi)。

試劑盒組成

■白蛋白顯色劑-------------250ml×1瓶
■總蛋白顯色劑---------- --250ml×1瓶
■標(biāo)準(zhǔn)血清---------------------3ml用×1瓶
■白蛋白修正緩沖液--------25ml×1瓶

產(chǎn)品編號	品名	規(guī)格	容量
292-63901	LabAssay (TM) A/G	細(xì)胞生物學(xué)	1,000次

LabAssay(TM)膽固醇[膽固醇氧化酶、DAOS法]

膽固醇是動(dòng)脈硬化等血管疾病的致病原因之一。

試劑盒組成

■緩沖液-----------------------------150ml×2瓶(MES緩沖液)

■顯色劑----------------------150ml用×2瓶 (溶解時(shí)：膽固醇酯酶，膽固醇氧化酶，過氧化物酶，DAOS，4-氨基安替比林，抗壞血酸氧化酶)

■標(biāo)準(zhǔn)液---------------------------10ml用×1瓶

性能

【靈敏度】蒸餾水作為樣品時(shí)，吸光值在0.11以下。特定濃度的標(biāo)準(zhǔn)液(200mg/dl) 作為樣品時(shí)，吸光值為0.13～0.65。

【特異性】可檢測1,000mg/dl的總膽固醇濃度。

【檢測波長】主波長：600nm, 副波長：700nm

試劑的配制

顯色劑：將1瓶顯色劑(150mL用)溶解于1瓶緩沖液(150mL)中。配制后，以2～10℃保存，可保存3星期。

標(biāo)準(zhǔn)操作法

向微孔板內(nèi)添加2μl樣品和300μl顯色劑，充分混合，在37℃孵育5分鐘。以此作為對照空白值，測量樣品及標(biāo)準(zhǔn)液的吸光值。

產(chǎn)品編號	品名	規(guī)格	容量
294-65801	LabAssay (TM) Cholesterol	細(xì)胞生物學(xué)	1,000次

LabAssay(TM) 肌氨酸酐[Jaffe'法]研究試劑

肌氨酸酐是由存在于肌肉、神經(jīng)內(nèi)的磷酸肌酸直接產(chǎn)生，或由肌酸脫水產(chǎn)生，經(jīng)腎毛細(xì)血管球過濾后被排除體外的代謝產(chǎn)物。利用Jaffe法，在堿性條件下，通過檢測苦味酸與肌氨酸酐反應(yīng)生成的橙紅色色素檢測樣品中肌氨酸酐含量。

特點(diǎn)

■蒸餾水作為樣品時(shí)，吸光值為0.010～0.020。
■使用已知濃度的血清進(jìn)行檢測時(shí)，在已知濃度的±10%以內(nèi)。

試劑盒組成

■除蛋白劑…150ml×1瓶
■苦味酸…50ml×1瓶
■0.75mol/L 氫氧化鈉溶液…50ml×1瓶
■標(biāo)準(zhǔn)液 (肌氨酸酐10mg/dl)…15ml×1瓶

試劑的制備

●除蛋白劑，苦味酸，0.75mol/L 氫氧化鈉溶液:全部都可以直接使用.
●標(biāo)準(zhǔn)液: 附帶的標(biāo)準(zhǔn)液可直接使用，或稀釋后作為系列標(biāo)準(zhǔn)液。

標(biāo)準(zhǔn)操作法

將300μl除蛋白劑和50μl樣品在樣品管中混合，室溫放置10分鐘，離心分離(2,500rpm以上反應(yīng)10分鐘)，回收上清。
向酶標(biāo)板的孔中加入100μl上清，再加入50μl苦味酸和50μl 0.75mol/L氫氧化鈉溶液，在25～30℃反應(yīng)20分鐘。
作為空白對照，檢測樣品及標(biāo)準(zhǔn)液的吸光值。

檢測波長

520nm

產(chǎn)品編號	品名	規(guī)格	容量
290-65901	LabAssay (TM) Creatinine	細(xì)胞生物學(xué)	500次

LabAssay (TM)尿酸[尿酸酶、TOOS法]

與微孔板配套使用，可用于小鼠血清中尿酸的檢測。

特點(diǎn)

■蒸餾水作為樣品時(shí)，吸光值為0.15以下。
■測量已知濃度的血清時(shí)，結(jié)果在已知濃度的±15％以內(nèi)。

試劑盒組成

■緩沖液----------------100ml×4瓶(磷酸緩沖液(pH6.4),TOOS)
■顯色劑------------100ml用×4瓶 (溶解時(shí)：尿酸酶，過氧化物酶，4-氨基安替比林，脂蛋白脂肪酶，抗壞血酸氧化酶)
■尿酸標(biāo)準(zhǔn)液------------10ml×1瓶

試劑的配制

顯色劑：將1瓶顯色劑(100mL用)溶解于1瓶緩沖液(100mL)中。配制后，2～10℃保存，可保存3星期。

標(biāo)準(zhǔn)操作法

向微孔板內(nèi)添加5μl樣品和300μl顯色劑，充分混合，37℃孵育5分鐘。以此作為空白對照值，測量樣品及標(biāo)準(zhǔn)液的吸光值。

檢測波長

主波長555nm(副波長700nm)

性能

蒸餾水測量時(shí)的吸光值<0.15。
特定濃度標(biāo)準(zhǔn)液(尿酸10mg/dL)測量時(shí)的吸光值為0.04～0.26。